Embryo culture
Synopsis: -Introduction
-Definition
-Principle
-Procedure
-Apllications
-Conclusion
-Reference
1.Introduction :- plant tissue culture को light, temperature or humidity पर संवर्धित किया जाता हैं। भ्रूण संवर्धन या emryo culture इन विट्रो निषेचन का एक घटक है। जहां परिणामी भ्रुण या embryo को गर्भाशय में डालने से पहले कृत्रिम माध्यम में कुछ समय के लिए बाढने दिया जाता हैं।
Embryo culture प्रथक अपरिपक्व या परिपक्व भ्रूण की संस्कृति है जईगोटिक या बीज भ्रूण अक्सर उपयोग में लाए जाते है।Embryo culture में उदा, के लिए कैलस culture को आरंभ करने के लिए plant tissue culture में अन्वेषक के रूप मे लाभदायक है। उतको को पोषक देते समय यह Embryo सही से development stages को ग्रहण करता है।development के दौरान Embryo मे या बीज से endosperm मौजूद था।
Embryo culture in vitro fertilization का एक घटक हैं। जहां परिणामी embryos को artificial medium मे कुछ समय के लिए बढ़ने दिया जाता हैं।
2.Defination :- संवर्धित हों रहे बीज में से वरुण या young embryo को निकालकर sterilized conditions मे पोषक पदार्थ पर संवर्धित करने की प्रक्रिया को embryo culture कहते हैं।
”Embryo culture is a process in which young Embryo removed from the developing Seed and cultured on artificial medium in sterilized conditions."
3.Principle :- सामान्यतया पोषक पदार्थ पर young Embryo का Culture विकास पूर्ण नहीं हो और यह सीधे ही पौधे में विकसित हो जाता है।
पोषक पदार्थों में निम्न में से कोई एक मिलाने से Embryo का समय से पहले अंकुरण रोका जा सकता है।
1. High sucrose concentration.
2. High ABA concentration.
कुछ पौधों में परिपक्व बीजों के भ्रूणों या Embryos का भी संवर्धन किया जाता है जैसे - Iris , Orchids etc.
Globulerstage के बाद के Embryo का Artificial culture अधिक आसान होता है। परंतु Cruciferae family के कुछ पौधों में केवल कुछ cells वाले embryo का culture करना संभव हो सका है। Young Embryo को Endosperm पर Cultured कर सकते हैं जिससे उसका पूर्ण विकास एवं परिवर्तन हो सके।
4. Procedure : -
1. Fruit के अपरिपक्व को पृथक करके 10 मिनट के लिए 5%Teepol Solution मैं डुबोकर रखते हैं।
2. अब Teepol को हटाने के लिए Explants को Normal water से धो लेते हैं।
3. अब इन immature Seeds के सतही 60 Second के लिए 70% Ethanol में डुबोकर रखते हैं। अतिरिक्त रसायन को Surface से हटाने के लिए 3 से 4 बार Sterilised distilled water से धो लेते है।
4. 10 मिनट के लिए 0.1% Hgcl2 के Solution मे deep करके रखते है।
5. अब Immature बीच पर चाकू या बुलेट की सहायता से कट लगाकर सुई या needle की सहायता से young embryo को पृथक कर लेते हैं। जिसे अब Explant कहा जा सकता है।
6. अब इन पृथक किए गए Embryo को micro pipette या छोटे चम्मचनुमा स्पेचुला की सहायता से 10 cm. Patridish मे 25 ml. ठोस agar medium पर स्थापित करते हैं। सामान्यतया 6-8 embryos का culture एक petridish मे किया जा सकता है।
7. Medium मे sucrose or ABA की concentration High रखी जाती हैं।
8. पेट्रीडिश को cello tap से सील या बंद कर देते हैं ताकि माध्यम को रोका जा सके।
9. अब इस petridish को incubator मे रख देते है। जहा इसे 25_+1°c तापमान व 16 घंटे का प्रकाशकाल दिया जाता हैं। प्रकाश देने के लिए cold white flourescent tubes का उपयोग किया जाता है।
10. लगभग 4 सप्ताहों मे embyro developed हो जाता हैं। और shoot system और root system banana शुरू कर देते हैं।
11. अब इसे नए ताजा medium पर बड़ी संवर्धन tube मे स्थापित करके उप संवर्धन कर लेते है। जिससे नया plant develop हो जाता है।
5. Applications :-
(1) Embryo rescue :- distant hybridization से बना embryo endosperm घास के कारण नष्ट हो जाता है। इसे नष्ट होने से बचाने के लिऐ young seeds से enbryo को निकालकर artificial रूप से suitable medium पर cultured करते हैं।
Example-
जौ*राई ,(barley* rye)
जौ*गेहूं (barley*wheat)
गेहूं*राई ,(rye*wheat)=triticale या man made wheat का निर्माण
In inter-specific hybridization - अंतर्जातीय संकरण में जब zygote से embryo विकसित हो रहा होता है। तो एक जाति के गुणसूत्र नष्ट हो जाते है। तथा embryo अगुणित हो जाता है ।
इस haploid embryo के artificial culture से haploid पौधे प्राप्त किए जाते हैं।
(2) Orchid ( प्रवर्धन) - orchid के बीजों में embryo तो होता है परंतु endosperm का आभाव होता है।
अतः इनके कृत्रिम संवर्धन से पौधे आसानी से develop किए जा सकते है।
6. Conclusion :- लंबी अवधि की संस्कृति के बाद अधिक व्यवहार्य भ्रूण का चयन करना संभव हो सकता है। सामान्य रूप से निषेचित भ्रूणों के खराब आकारिकी (ग्रेड IIAB-III) के बावजूद, उनमें से लगभग एक-तिहाई विकसित होने में सक्षम हैं।
7. References:-
Glujovsky, Demian, Farquhar, Cindy, Quinteriro Retamar, Andera marta, ,(2016-06-30)
"Cleavage stage versus blastocyst stage Embryo Transhfer in assisted reproductive technology."
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